Segundo o geneticista Rodrigo Giglioti, o RNA obtido de sangue pode ser altamente vulnerável à degradação, e, consequentemente, pode resultar em padrões de expressão gênica falsamente alterados. “Assim, o armazenamento adequado das amostras, antes do procedimento de extração do RNA, é de extrema importância para manter a qualidade e integridade do RNA.”

Diferentes métodos de extração de RNA têm sido aplicados para evitar a degradação do RNA. O congelamento instantâneo com nitrogênio líquido (-180°C) é uma das formas mais comuns, embora a criopreservação nem sempre seja possível ou prática, de acordo com o pesquisador. Reagentes de estabilização também são comumente aplicados, como tubos para colheita de amostras de sangue, contendo soluções estabilizantes de RNA e reagentes estabilizantes que são aplicados no momento de armazenamento do RNA.  

“Muitas pesquisas têm sugerido o uso desses reagentes estabilizantes, além do uso de um kit de extração de RNA comercial adequado. Contudo, os custos relacionados ao uso desses reagentes e kits podem ser muito altos, especialmente para experimentos, que incluem um tamanho amostral alto”, explica Giglioti. 

A pesquisa publicada na Revista Molecular Biology Reports  demonstrou que amostras de sangue total bovino (contendo anticoagulante EDTA) podem ser armazenadas até três dias, em temperatura de geladeira comum (4°C) para extração de RNA, sem influenciar sua qualidade e integridade. Os intervalos de extração e armazenamento avaliados foram de duas horas, um dia, dois dias, três dias, sete dias e 14 dias após a colheita das amostras de sangue. 

Segundo Giglioti, existem poucos estudos disponíveis com foco na avaliação da integridade do RNA e expressão gênica durante o armazenamento de amostras de sangue total bovino. “Até onde sabemos, este foi o primeiro estudo a avaliar o tempo de armazenamento do RNA de sangue total bovino não tratado em geladeira comum e sem adição de quaisquer reagentes estabilizadores de RNA. Os resultados podem constituir uma informação valiosa para estudos, visando o RNA mensageiro bovino em amostras de sangue”, ressalta.

Lisley Silvério (MTb. 26.194)
Assessora de Imprensa - Instituto de Zootecnia
Secretaria de Agricultura e Abastecimento
Governo do Estado de São Paulo
Fone: +55 (19) 3476-0841
lsilverio@sp.gov.br
www.iz.sp.gov.br   | www.agricultura.sp.gov.br